生物技术研究 | 梯度醇沉蒲公英多糖研究
生物技术研究 | 梯度醇沉蒲公英多糖研究
摘要:以蒲公英为原料,经热水提取、不同体积分数乙醇(30%,50%,70%和90%)分级沉淀,得到4种蒲公英多糖(DPs-30、DPs-50、DPs-70和DPs-90),探究其理化性质和抗氧化活性及其之间的相关性。本文采用苯酚-硫酸法、考马斯亮蓝法、硫酸-咔唑法及福林酚法分别测定蒲公英多糖中的总糖、蛋白质、糖醛酸和多酚含量并分析其理化性质,利用DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)自由基清除试验、羟基自由基清除试验、超氧自由基清除试验、ABTS(2,2'-联氮-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐)自由基清除试验及总还原能力测定,评估其抗氧化活性。采用Pearson法分析理化性质和抗氧化活性之间的相关性。结果表明,随乙醇浓度的升高,蒲公英多糖中的总糖和多酚含量逐渐上升,DPs-90中两者含量均最高,分别为50.67%±1.07%和6.79%±0.08%;糖醛酸和蛋白含量则呈先增后降趋势,其中DPs-70中两者含量均最高,分别为25.59%±0.28%和19.01%±1.35%。在0.125~2 mg/mL浓度范围内,4种蒲公英多糖均表现出良好的抗氧化能力,总体顺序为DPs-90>DPs-70>DPs-50>DPs-30。其中DPs-90对DPPH自由基、ABTS自由基、羟基自由基和超氧自由基的IC 50分别为0.139,0.01,0.15,1.359 mg/mL,总还原能力为1.11 mmol Fe 2+/g,其活性低于阳性对照抗坏血酸(Vc)(IC 50分别为0.084,0.002,0.142,0.08 mg/mL,总还原力为3.31 mmol Fe 2+/g)。相关性分析表明,总糖和糖醛酸含量与自由基清除能力呈显著正相关,二者是蒲公英多糖发挥抗氧化作用的主要成分。总之,高浓度乙醇有助于富集活性多糖,但同时也会伴随引入较多的酚性物质。